Cartera de servicios

NO-Anatomia Patologikoa

Oferta Asistencial

Para desarrollar el tema de la oferta asistencial que se realiza en el Servicio de Anatomía Patológica, vamos a comenzar con la descripción de los servicios, centros y hospitales que nos envían muestras.

Recibimos muestras del:

  • Complejo Hospitalario de Navarra.
  • Hospital García-Orcoyen.
  • CASSYR de toda Navarra.
  • Hospital Reina Sofía (Tudela)
  • Centro de consultas Dr. San Martín.
  • Centros de Salud.
  • Hospital San Juan de Dios.
  • Se realizan todas las autopsias clínicas de Navarra.

Cartera de Servicios

Nuestro trabajo se centra en tres tipos de muestras:

  • Biopsias que se pueden subdividir.
  •           Pequeñas: endoscópicas, piel, etc
  •           Grandes: piezas quirúrgicas.
  • Citologías que se subclasifican:
  •           Ginecológicas
  •           Generales
  •           Punciones (PAAF)
  • Autopsias:
  •           Adultos
  •           fetales
  • Las Biopsias intraoperatorias: requieren una explicación adicional porque precisa de la presencia física del facultativo cuando es requerido desde el quirófano. Se preparan cortes inmediatos mediante un sistema de corte en congelación (criostato) y se emite un diagnóstico inmediato. Esta tarea resulta muy compleja.

Todas las muestran descritas hasta ahora pueden requerir las técnicas básicas histológicas o citológicas, o bien precisar también de técnicas complementarias.

 

TÉCNICAS COMPLEMENTARIAS

  • 1-ESTUDIO HISTOQUÍMICO O TÉCNICAS HISTO-ENZIMÁTICA (B. MUSCULARES).

    El objetivo de la histoquímica es poner de manifiesto una molécula o familia de moléculas presentes en una sección histológica y estudiar su distribución tisular "in situ".

    Hay dos tipos de técnicas histoquímicas: reacciones químicas y enzimáticas.

    -Las reacciones químicas consisten en la modificación química de moléculas del tejido para posteriormente poder colorearlas. Existen técnicas histoquímicas para detectar glúcidos, proteínas y nucleótidos.

    -La histoquímica enzimática se basa en la capacidad que tienen algunos enzimas del tejido de mantener funcional su centro activo tras el proceso de fijación. Estos enzimas y las células que los poseen se ponen de manifiesto mediante una reacción enzimática que convierte a unos sustratos solubles e incoloros en productos insolubles y coloreados.

     Disponemos de un total de 28 técnicas.

  • 2-ESTUDIOS INMUNOHISTOQUÍMICOS (IHQ).

    La inmunohistoquímica es un procedimiento que tiene como objetivo detectar, amplificar y hacer visible un antígeno específico, que generalmente es una proteína. Esta técnica permite identificar la localización de una sustancia específica a nivel tisular o celular. Se basa en la utilización de anticuerpos que se unen específicamente a una sustancia que se quiere identificar (antígeno primario).

    Disponemos de un total de 330 anticuerpos disponibles para ser utilizados sobre muestras histológicas y citologías.

  • 3-INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA.

    La inmunofluorescencia es una técnica de inmunomarcación que hace uso de anticuerpos unidos químicamente a una sustancia fluorescente para demostrar la presencia de una determinada molécula.

    La inmunofluorescencia primaria, o directa, también conocida por sus siglas IFD (inmunofluorescencia directa), hace uso de un único anticuerpo que se encuentra químicamente unido a un fluorocromo. El anticuerpo reconoce la molécula diana y se une a ella directamente. En el caso de utilizarse como técnica de tinción inmunohistoquímica la región donde se deposita la molécula diana puede ser identificada al microscopio de fluorescencia como una zona brillante.

  • 4-MICROSCOPÍA ELECTRÓNICA.

    Un microscopio electrónico usa electrones en lugar de luz visible para formar imágenes de objetos diminutos. Los microscopios electrónicos permiten alcanzar amplificaciones mayores antes que los mejores microscopios ópticos, debido a que la longitud de onda de los electrones es bastante menor que la de los fotones "visibles".

    Se utiliza para estudio de las biopsias renales fundamentalmente.

  • 5-TÉCNICAS MOLECULARES:

    • A) La técnica Next Generation Sequencing (NGS) o Secuenciación Masiva es una tecnología de secuenciación del DNA que permite la amplificación del genoma de un individuo, mediante la secuenciación en paralelo de millones de pequeños fragmentos de ADN (Bejhati). Toda esta información en forma de pequeñas secuencias se integra mediante análisis bioinformáticos, mapeándose las lecturas individuales obtenidas en el genoma humano de referencia. Cada uno de los tres billones de bases del genoma humano se secuencia en múltiples ocasiones con el fin de asegurar la secuencia correcta y detectar variantes en el genoma.
    • El test utilizado para el análisis de alteraciones en tumor es el Oncomine Focus Assay (OFA) de Thermo Scientific, validado para diagnóstico, y Ion520 Chip (3 a 5 millones de lecturas). El ensayo OFA permite la detección rápida de más de 1.000 variantes de 52 genes cruciales en tumores sólidos, incluso desde muestras parafinadas de mínimo tamaño. Las variantes incluyen mutaciones puntuales, SNVs (variaciones de un solo nucleótido), indels (inserciones y deleciones), CNVs (variaciones en el nº de copias) y fusiones génicas de DNA o RNA en un solo flujo de trabajo. Estas variantes son tratables mediante fármacos oncológicos disponibles en el mercado, o en fase de ensayo clínico.
    • A) PCR: Se usa para la amplificación de secuencias específicas de ADN o ARN en células o secciones de tejido, de forma que el número de copias se incrementen en PCR in situ a niveles detectables por métodos estándar de hibridación in situ. Su principal utilidad se da para identificar secuencias de ADN que no son fáciles de detectar usando hibridación in situ estándar.
    • B) FISH: Es una técnica que detecta secuencias de ácidos nucleicos en células o tejidos preservados mediante el empleo de una sonda marcada con un fluorocromo, la cual va dirigida hacia un lugar específico del cromosoma y que emite fluorescencia que puede ser observada por medio de un microscopio. Se caracteriza por permitir la visualización directa de las alteraciones genéticas en la célula. El principio básico de FISH es hibridar una sonda de oligonucleótidos marcada con fluorescencia a una secuencia de interés dentro de un célula y visualizar o contar la señal fluorescente resultante por microscopia u otro método.
  • 6. OTROS

     

    • Elaboración de matrices de tejidos (Tissue-microarrays)
    • CISH (hibridación in “situ cromógena”) de virus de Epstein-Barr, y cadenas ligeras kappa y lambda.
    • SISH: para amplificación de Her-2.
    • Estudio intraoperatorio de de ganglio centinela en cáncer de mama mediante OSNA (One Step Nucleic Acid Amplification).